比色皿的選擇與鑒別 

比色皿的制造工藝有兩種，一種是粘合劑粘合而成，另一種是高溫熔融而成。比色皿的材料通常來源于石英、熔凝硅石和光學玻璃。玻璃比色皿對紫外線幾乎全部吸收，吸光度非常大。

而石英比色皿的吸光度則小得多。常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形，容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細管皿。另外還有高、低溫、恒溫比色皿。  

比色皿有不同的光程長度，一般常用的有0.5、l、2、3、5cm ，選擇哪種光程長度的比色皿，應視分析樣品的吸光度而定。當比色液的顏色較淡時，應選用光程長度較大的如2cm、3cm比色皿；當比色液的顏色較深時，應選用光程長度較小的如0.5cm 、lcm比色皿，以使所測溶液的吸光度在0.1-0.7之間。 

 比色皿有方向性。有些比色皿上標有方向標記，使用時必須注意。無方向標記的比色皿應予以校正，校正時要先確定方向并作好標記，以減少測定誤差。

比色皿的校正方法 

將純凈的蒸餾水注入比色皿中，把其中吸收最小的比色皿的吸光度置為零，并以此為基準，測出其它比色皿的相對吸光度。測定比色液時，應將其吸光度減去比色皿的吸光度。同一組比色皿相互間的差異應小于測定誤差，在測定同一溶液時，吸光度差值應小于0.5％ ，否則應對差值進行校正。 

比色皿的光程長度也需校正，校正時可將吸光度約為0.4的溶液分別注入校正皿和具有準確光程長度的標準比色皿中，測定吸光度。以標準比色皿的吸光度為1.00，求出校正比色皿吸光度的相對值作為該比色皿的校正系數。測定比色液時，可將所測得的吸光度乘以該皿的校正系數以得到實際吸光度值。
比色皿的選擇

比色皿選擇或使用不當,造成無法測量或引起測量誤差的現象在實驗中經常出現，這一問題又很容易被實驗人員忽視。  

紫外區的定義為190-400nm，石英比色皿可用于190-900nm，玻璃比色皿用于360-900nm，紫外區的一定要用石英比色皿，必須配置紫外/可見分光光度計，否則低波長段不能分析。  對于一般的非光學專業人員，用眼睛是不能分開石英比色皿和玻璃比色皿的。但兩者硬度差別很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（絕對值）幾十倍，如果把兩個對磨，石英比色皿將很少被磨損，而玻璃比色皿磨損非常大。  

由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米(120nm-4500nm)，廣泛的譜段范圍內沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4—4微米（400-4000nm），且有許多離子吸收峰。所以，石英比色皿要比玻璃比色皿優越的多，化驗數據更準確、更可靠。
比色皿的鑒定
用手摸或者肉眼就能觀察出來，只有光學技術人員憑經驗“靠肉眼比較折光率差別”可以準確判定，他們肉眼觀察微弱的離子吸收現象，靠經驗評價也能區分。但是，對沒有經驗的人員來說，極易發生判定錯誤。 
石英比色皿上有一個Q字樣(quartz石英)，而玻璃的上面有一個G字樣(glass玻璃)，從字面上可以直接區分兩種比色皿，如果字樣已經沒有啦，只能上機在紫外區實測啦，在紫外區透過率大是石英的，幾乎沒有透過率的是玻璃的。市面上賣的比色皿造型不是完全一樣的，有的沒有石英標識。可在紫外波長下檢測空比色皿的吸光度，玻璃的吸光度要比石英的大。  
將光度計的波長設定為250nm，樣品室內不放任何物品，調零，然后將比色皿置于樣品道一側，吸光值小于0.07Abs的是石英材料，反之是玻璃材料。注：如果吸光值稍稍大于0.07Abs 的話，有可能也是石英材料的，只不過是杯子內壁沒有洗凈之故。
使用和注意事項 

在使用比色皿時,兩個透光面要完全平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。 

比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面粘結而成。

使用時注意事項

1.拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面。

2.不得將光學面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。

3.凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。

4.比色皿在使用后,應立即用水沖洗干凈。必要時可用1∶1的鹽酸浸泡,后用水洗干凈。

5.不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或干燥箱內烘烤。

6.使用前將比色皿在2%的硝酸溶液中浸泡24小時，然后用水，蒸餾水依次沖洗干凈，擦干。

7.比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水，在比色波長下進行比較，誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定，可避免因比色皿差異造成測量誤差.

8.比色皿中的液體，應沿毛面傾斜，慢慢倒掉，不要將比色皿翻轉，直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液，然后用蒸餾水沖洗比色皿內部倒掉（操作同上）避免液體外流，使第2次測量時不用擦拭比色皿，不致因擦拭帶來的誤差。
比色皿的洗滌方法
分光光度法中比色皿潔凈與否是影響測定準確度的因素之一。因此，必須重視選擇正確的洗凈方法。

每次使用完畢的比色皿，一般先用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗三次，倒置于干凈的濾紙上晾干，然后存放于比色皿盒中。如果比色皿被有機物污染，宜用鹽酸-乙醇(1+2)混合液浸洗，也可用相應的有機溶劑浸泡洗滌。

如：油脂污染可用石油醚浸洗，鉻天青顯色劑污染可用硝酸(1+2)浸洗等。比色皿不可用堿液洗滌，也不能用硬布、毛刷刷洗。 

含有能腐蝕玻璃物質的溶液，如氫氟酸、氟化物的高濃度溶液不可放人比色皿中。含氟離子濃度低的溶液也不宜在皿中久置。比色皿質地較脆，石英皿尤甚，使用時動作要輕，切勿摔碰。市場面上一般使用的石英比色皿均為石英粉燒接的，專用超聲波清洗， 洗比色皿清洗時毛面朝下。
石英比色皿清潔方法

1．用乙醚和無水乙醇的混合液（各50%）清洗。  

2. 若太臟可用專用洗液清洗。但時間要短（10分鐘)，再用清水清洗干凈。 

3. 不要用洗潔精之類的清潔劑，以免影響測量。  

注: 高級分光光度計都采用技術加工的石英比色皿,采用石英本體材料經過高溫熔融膠合，減少污染,使用壽命更長(價格是普通石英比色皿二倍)。 

如何對比色皿進行清洗，只能按照各種試劑，采用能溶解中和的方法來進行清洗，原則上一是不能損壞比色皿的結構和透光性能；二是能夠采用中和溶解的方法來達到比色皿干凈如初的效果。   

1.比如測定溶液是酸，如果不干凈，就用弱堿溶液洗，要是測定溶液是堿，如果不干凈，就用弱酸溶液洗，要是測定溶液是有機物質，如果不干凈，就用有機溶劑，比如酒精等溶液洗。

2.選擇比色皿洗滌液的原則是去污效果好，不損壞比色皿，同時又不影響測定。

3.分析常用的鉻酸洗液不宜用于洗滌比色皿，這是因為帶水的比色皿在該洗液中有時會局部發熱，致使比色皿膠接面裂開而損壞。同時經洗液洗滌后的比色皿還很可能殘存微量鉻，其在紫外區有吸收，因此會影響鉻及其他有關元素的測定。一般主張使用硝酸和過氧化氫（5：1）的混合溶液泡洗，然后用水沖洗干凈。   

4.對一般方法難以洗凈的比色皿，還可以采取以下兩種方法：

A、先將比色皿侵入含有少量陰離子表面活性劑的碳酸鈉（20克/升）溶液泡洗，經水沖洗后，再于過氧化氫和硝酸（5：1）混合溶液中侵泡半小時。    

B、在通風櫥中用鹽酸、水和甲醇（1：3：4）混合溶液泡洗，一般不超過10分鐘。  

5.黑壁微量石英比色皿，因其材質的不一致，尤其要注意不能放在酒精里浸泡，用完后，可以立即用棉球或擦鏡紙沾酒精清洗，晾干，然后存放于干凈的容器或盒子中備用。 

6.熔融一體比色皿，可以參照玻璃粉高溫燒結的比色皿清洗方法，可以長時間浸泡在酒精或酸性溶液，也可以超聲波清洗機清洗，操作時應將超聲頻率調至最低限度，避免頻率過高導致比色皿破損。 

先用清水涮洗三次，然后用清洗液洗三次，最后再用清水洗三次，比色皿上沒有污漬即可，然后放入干凈的容器內，晾干，以備下次使用。